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Polysciences PEI 轉染試劑:科研與工業應用的全面解析與使用指南

更新時間:2025-03-17點擊次數:52

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在基因功能研究、蛋白質表達和細胞治療等領域,高效的基因轉染技術是實驗成功的關鍵。Polysciences PEI 轉染試劑憑借其卓i越的性能和廣泛的適用性,成為全球科研工作者和生物技術企業的首i選工具。本文將深入解析其核心優勢、使用技巧及典型應用場景,助您快速掌握這一高效轉染方案。

一、Polysciences PEI 轉染試劑的核心優勢

1. 高效性與廣譜適用性

   PEI(聚乙烯亞胺)作為陽離子聚合物,通過靜電作用與DNA結合形成穩定復合物,高效穿透細胞膜,尤其適用于難轉染的細胞系(如原代細胞、懸浮細胞)。其轉染效率在HEK293CHO、昆蟲細胞等常見模型中表現優異,甚至超越脂質體試劑。

 

2. 低細胞毒性,高兼容性  

   與部分傳統轉染試劑相比,Polysciences PEI 經過優化配方處理,顯著降低細胞毒性,確保轉染后細胞活性維持在較高水平,適用于長期基因表達實驗。

 

3. 成本效益顯著

   PEI試劑價格遠低于脂質體或病毒載體,且用量少,適合大規模生產(如重組蛋白、抗體藥物開發),大幅降低實驗室或工業級實驗成本。

 

4. 操作簡便,穩定性強

   無需復雜步驟或特殊設備,試劑與DNA混合后即可使用,且可在4°C長期保存,避免反復凍融對效果的影響。

二、Polysciences PEI 轉染試劑使用步驟詳解

實驗準備

- 細胞狀態:確保細胞處于對數生長期,融合度達70%-80%。  

- 試劑比例:DNAPEI的比例需優化(常用范圍1:21:4),不同細胞系需預實驗確定最佳配比。  

 

操作流程

1. 復合物制備:將稀釋后的PEIDNA在無血清培養基中混合,靜置15-30分鐘。  

2. 轉染處理:將復合物逐滴加入細胞培養基,輕柔混勻后繼續培養。  

3. 結果檢測:通常在24-72小時后通過熒光顯微鏡(GFP標記)、Western BlotqPCR評估轉染效率。  

 

優化建議  

- 對于敏感細胞,可在轉染4-6小時后更換新鮮培養基以減少毒性。  

- 使用血清培養基時,需確保復合物形成階段使用無血清環境以避免干擾。

 

三、典型應用場景與成功案例

1. 重組蛋白生產  

   在CHO細胞中,Polysciences PEI 成功實現高表達量單克隆抗體的穩定生產,被多家生物制藥企業用于臨床級蛋白制備。

 

2. 基因編輯(CRISPR/Cas9

   通過PEI遞送Cas9質粒與sgRNA,在神經干細胞中實現高效基因敲除,助力神經退行性疾病機制研究。

 

3. 病毒載體包裝

   與慢病毒或腺病毒包裝系統聯用,顯著提高病毒滴度,廣泛應用于基因治療研究。

四、常見問題解答(FAQ

Q1:轉染后細胞死亡較多,如何解決?

- 降低PEI/DNA比例或復合物孵育時間。  

- 轉染后4-6小時更換培養基,減少試劑暴露時間。  

 

Q2:懸浮細胞轉染效率低怎么辦?

- 優化離心轉染法(如使用Pluronic F-68增強復合物接觸)。  

- 調整細胞密度至1×10^6 cells/mL,并增加DNA用量。  

 

Q3:能否用于體內轉染?  

- PEI適用于局部注射(如腫瘤模型),但需注意劑量控制以避免免疫反應。推薦使用體內專用修飾型PEI試劑。

五、與其他轉染試劑的對比

特性

Polysciences PEI

脂質體試劑

病毒載體

轉染效率

高(廣譜)

中高(依賴細胞)

極i高

細胞毒性

中高

低(但存在生物風險)

成本

極i高

實驗周期

短(24-48小時)

長(需包裝病毒)

適用場景

常規研究、大規模生產

貼壁細胞

難轉染細胞、體內

 

六、購買與技術支持

Polysciences PEI 轉染試劑可通過授權經銷商(如柏萊源(天津)生物科技有限公司)或直接采購。推薦選擇線性PEI(分子量25 kDa貨號:23966)或支鏈PEI貨號:24765),根據實驗需求選擇。技術支持團隊提供詳細Protocol及細胞特異性優化方案,可通過獲取最新應用文獻。

七、結語  

無論是基礎研究還是工業級生物生產,Polysciences PEI 轉染試劑以其高效、經濟、易用的特點,成為基因遞送領域的黃金標準。通過合理優化實驗條件,您可輕松實現從質粒DNA到功能性蛋白的高效轉化,加速科研突破與產業化進程。立即聯系柏萊源生物,獲取免費試用裝或技術手冊,開啟您的高效轉染之旅!

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