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TECHNICAL ARTICLES
轉染，顧名思義，是指將某種物質轉移到細胞內，是分子生物學和細胞生物學研究的重要技術。在生物醫學研究中，這個“物質”通常指的是DNA或RNA。通過轉染，我們可以向細胞引入新的基因，或者沉默或敲低細胞內的某個基因，從而進行基因功能研究、基因表達調控，或是進行基因治療等。在實驗過程中，選擇哪種細胞受體也有一定要求，本期我們就來了解一下常用于轉染的細胞類型有哪些吧？常用于轉染的細胞包括原代細胞、原代細胞衍生物、腫瘤細胞系、幼倉鼠腎細胞（BHK-21）、人胚腎細胞（HEK-293）、人...
目前，將外源DNA導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類，即生物方法和物理化學方法。生物方法主要以病毒作為載體，通過病毒感染的方式將外源DNA導入到細胞中，其中以逆轉錄病毒及腺病毒轉染系統最為常用。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、脂質體介導的轉染、顯微注射、電穿孔，以及最近出現的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術。其中常用的是化學方法，磷酸鈣、聚乙烯亞胺（PEI）、脂質體等化學試劑較為常用，那么接下來著重探討一下PEI轉染試劑的作用原理及比較吧。PEI轉染試劑的作用原理使用廣...
造血干細胞(Hemopoieticstemcells,HSC)有高度的自我更新和多向分化潛能，可以產生所有成熟的血細胞，如紅細胞、白細胞、血小板和淋巴細胞等，并且具有重建整個造血系統的潛能。可根據其來源將其分類為臍帶血造血干細胞、骨髓造血干細胞、外周血造血干細胞。在眾多研究和臨床應用中，造血干細胞被廣泛用于治療急性白血病等血液系統疾病。由于其來源部位獲得不易，造血干細胞十分珍貴，所以其體外擴增既要保持自我更新能力的同時還要阻止其分化。怎樣培養造血干細胞呢？近年來大量實驗表明，...
誘導多能干細胞（inducedpluripotentstemcells，iPSCs）是近年來干細胞研究和臨床治療領域的熱門課題，為再生醫學和醫藥技術的發展提供了新的機會，具有里程碑意義。那么關于誘導多能干細胞你知多少？什么是誘導多能干細胞指由數個重編程基因導入人體細胞逐步誘導獲得，不涉及倫理，且具備胚胎干細胞（ESCs）無限更新增殖和向所有細胞組織器官分化的能力，可以分化出這個人的血細胞，骨細胞，神經細胞等，進而培養出這個人的臟器，骨頭，眼角膜等。因此iPSCs又被稱為人造胚...
蛋白Marker即蛋白分子量標準，是一些已知分子量的蛋白質的混合物，像“尺子”一樣用來指示蛋白質條帶的大小。在WesternBlot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣雖然是其中小小的一環，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。Marker的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量精確無誤了，實驗結果才有說服力，除此之外，蛋白Marker還有顯示轉膜是否成功、以及蛋白在凝膠上的電泳程度等作用，因此選擇正確的蛋白Marker也是Western...
細胞凍存和復蘇是在細胞研究和生物醫學領域中常見的實驗技術，用于長期保存和重復使用細胞。此步驟是細胞培養中的關鍵環節，直接影響細胞存活率和活力，關系到后續細胞實驗能否按照計劃有效地進行。要想做好細胞凍存和復蘇，首先請牢記下面這四個字：慢凍快融！慢凍快融！慢凍快融！重要的事情說三遍！那么細胞實驗中為什么要“慢凍快融”呢？凍存細胞時，細胞內外環境中的水會形成冰晶。如果直接將細胞凍存到-196℃的液氮中，由于凍結過程中胞外溶液中的水先結冰，使胞外溶液不斷濃縮，引起細胞電解質升高、滲透...
在細胞實驗中，我們通常通過凍存的手段讓細胞代謝變得緩慢，從而達到長期保存或保種的目的，以供后續實驗的使用，那么如何讓細胞“凍”起來使之不變與永恒逐漸成為一個熱門話題，接下來一起來探究一下吧！【低溫儲存】隨著細胞被冷凍至冰點以下，懸液中冰晶和溶質的濃度有所增加。如果冷卻過程中，胞內水分可以滲出細胞，則可以減少胞內冰晶。通常1℃/min的降溫速度可以促進此過程。但是，水分的喪失會導致細胞收縮，當這種收縮達到一定程度，又會導致細胞活性的劇烈下降。冷凍保護劑，如甘油或者二甲基亞砜（D...
當你導師安排養一個沒養過的細胞，不知道用什么培養基的時候，是否也在為選培養基而苦惱?面對DMEM培養基、MEM培養基、F12培養基、1640培養基等種類繁多的培養基時要怎么選擇呢？這種時候大家要一起記住：ü沒有什么培養條件是jue對正確的；ü沒有什么細胞是咱養不活的；ü參考文獻沒有那就不參考了；ü反正文獻也不一定是對的；但如果你的細胞沒STR鑒定過，沒有親自原代分離過，還各種支原體立克次氏體污染、黑膠蟲污染，那你當我沒說。我勸你盡快丟掉！讓我們先科普下培養基的選擇。目前合成培...
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